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elisa试剂盒实验正确的加样方式

做实验的时候知道怎么加样吗?.上海科博瑞生物有限公司来告诉你。ELISA试剂盒在的运用进程中常见疑问有很多,对效果影响极大;保温设备不良;洗刷用水不规范。 

Elisa试剂盒实验的加样方法需要遵循以下步骤以确保结果的准确性:


1. 样本准备:根据试剂盒说明书的要求,对样本进行适当的处理和稀释。确保样本没有沉淀物,并且已经完全解冻并混匀。

2. 加样前准备:将所有试剂和样本恢复至室温,以减少温度差异对实验结果的影响。

3. 标准曲线制备:按照试剂盒说明书配置不同浓度的标准品,并依次加入到微孔板的标准品孔中。

4. 样本加样:使用移液枪精确吸取待测样本,并按照说明书规定的顺序和体积加入到对应的孔中。

5. 密封微孔板:使用板盖或密封膜覆盖微孔板,避免蒸发和污染。

6. 孵育:将微孔板放入恒温孵育器中,根据试剂盒说明书设定合适的温度和时间,使抗原或抗体充分结合。

7. 洗涤:孵育结束后,小心移除板盖,弃掉液体,使用洗涤液清洗孔洞多次,去除未结合的物质。

8. 酶标二抗加样:加入酶标二抗溶液,再次孵育,让二抗与已结合的抗原或抗体反应。

9. 再次洗涤:重复洗涤步骤,去除多余的酶标二抗。

10. 底物加样:加入底物溶液,在室温下孵育一段时间,酶会催化底物发生颜色反应。

11. 停止反应:根据试剂盒说明书加入停止液,立即终止颜色反应。

12. 读数:使用酶标仪读取各孔的吸光度(OD值),根据标准曲线计算样本中目标物质的浓度。

整个加样过程中,要注意避免空气泡的产生,保证移液的准确性和重复性,并严格遵守试剂盒的操作指南,以获得可靠的实验结果。
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