ELISA新版本的样本处理办法

1、 血浆

用含抗凝剂的采血管或离心管收集血液标本，标本收集后30min内4℃ 1000×g离心15min，取上清即血浆。将上清分装多份，-20℃或-80℃保存，避免重复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。

2、 细胞培养上清

取细胞培养今日上清到离心管，1000×g离心20min，除去细胞碎片及杂质，取上清，-20℃或-80℃保存，避免重复冻融。

3、 细胞裂解液

1. 吸去培养板内的培养基，用胰酶消化细胞，加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省掉。

2. 收集细胞悬液，1000×g离心10min，弃去培养基，用预冷的PBS润洗3次。

3. 参与适量的预冷PBS或细胞裂解液（临用前参与蛋白酶抑制剂）重悬细胞。一般6孔板一个孔的细胞量需求150~250μL PBS重悬。

4. 将样品放入-20℃或-80℃，使样品冷冻，再放室温冻结样品，重复冻融几回，使细胞充沛裂解。也可将样品进行超声破碎，以抵达裂解的目的。

5. 4℃ 10000×g 离心10min，除去细胞碎片，取上清，-20℃或-80℃保存，避免重复冻融。

4、 血清

血清是常用于ELISA检测的一类样本，处理也比较简单。

用无热原、无内毒素的试管或离心管收集血液标本，将试管或离心管室温放置2小时或4℃过一夜，使血清分出。（将试管或离心管倾斜放置，使液面横截面增大，能使血清更大程度的分出。）4℃ 1000×g离心20分钟，仔细收集上清。建议将血清分装多份，-20℃或-80℃保存，避免重复冻融。