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生化试剂盒原理

一：生化试剂盒检测原理

生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应，其反应过程可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图。

延迟区：无规律可寻。

等速区：对应的是速率法，一般应用于酶活力的检测。

过渡区：对应的是固定时间法，目的是解决某些化学反应的非特异性问题，提高准确度。

平衡区：对应的是终点法，主要是测定某物质在样本中的含量。

试剂盒里哪些可以自行进行调整？

（1）样品质量：提取液体积比，用户可以根据预测定结果自行调整，测定结果偏低，可以适当加大上述比值，测定结果偏高，可以适当减小上述比值。但是同一批样品测定应该保持同样的上述比值。

（2）反应时间，用户可以根据预测定结果自行调整，原则是吸光度变化必须保持线性。吸光度变化偏小，可以适当延长反应时间；吸光度变化偏大，可以适当缩短反应时间。但是，同一批样品测定应该保持同样的反应时间。

（3）数据的单位，用户可以根据数据大小和习惯表达方式，进行适当调整，包括摩尔单位、时间单位和质量单位等，通常应该保证数据在小数点前三位和小数点后三位。

（4）同一研究的一批指标，应该调整为同样的单位，从而可以进行比较，便于分析。例如，物质浓度应该都用摩尔系列的单位，酶活性都用摩尔浓度/单位毫克蛋白质/单位时间，等等。

5、可以改变说明书中加试剂顺序吗？

绝对不可以，否则可能造成反应不能正常进行，导致测定失败。强烈建议加完试剂后立即混匀。

目前，我公司的生化试剂盒采用的原理为：可见区的显色反应和紫外区的某一物质变化量。某物质与显色剂反应后，形成区别于自身的颜色反应，在某一波长下，吸光度的强弱与物质的含量呈正比关系。

生化测定结果的表现形式：

① 物质浓度：单位主要是mg/L、mmol/L、μmol/mgprot等

② 某种能力和活力：世界上没有真实物质存在，以另一真实存在的物质变化量来表示其能力大小;其单位为U/L、U/gprot等。例如酶活的单位：在特定条件下，每分钟内转化1 μmol底物的酶量为一个单位(U)，或者转化1 μmol的有关基团的酶量。