- 起订量 (盒)价格
- 1-2¥1800 /盒
- ≥2¥1260 /盒
- 品牌:科博瑞
- 产地:上海
- 型号:96T/48T
- 货号:KBR-HS12219
- 发布日期: 2024-06-04
- 更新日期: 2024-11-20
产地 | 上海 |
保存条件 | 2-8摄氏度 |
品牌 | 科博瑞 |
货号 | KBR-HS12219 |
用途 | 科研 |
检测方法 | 夹心法 |
保质期 | 6个月 |
适应物种 | 小鼠,大鼠,植物,鱼,虾,蟹,牛,羊,狗,猫,微生物,细胞,土壤等动植物 |
检测限 | 咨询 |
数量 | 1 |
包装规格 | 96T/48T |
标记物 | HRP |
样本 | 血浆,唾液,尿液,组织,细胞上清,等 |
应用 | |
是否进口 | 否 |
兔瘟病毒2型抗体(RHDV2-Ab)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:
96T
1pg/ml-45pg/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定兔血清、血浆及相关液体样本中瘟病毒 2 型抗体(RHDV2-Ab)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中兔瘟病毒 2 型抗体(RHDV2-Ab)水平。用纯化的
抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入瘟病毒 2 型抗体(RHDV2-Ab),
再与 HRP 标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻di洗涤后加底物 TMB
显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深
浅和样品中的瘟病毒 2 型抗体(RHDV2-Ab)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度
(OD 值),通过标准曲线计算样品中兔瘟病毒 2 型抗体(RHDV2-Ab)浓度。
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,
然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白孔调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最hao
控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最hao做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值
大于标准品孔第yi孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计
算时请最hou乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月